应用领域
在cDNA合成过程中去除发夹环。1个
使用内部标记或末端标记的探针对RNA转录物的末端和外显子结构进行高分辨率定位(通常称为Berk-Sharp或S1定位)。2-5
通过消化单链突出末端来限制或修饰限制性位点。2
切割单碱基对错配,以替代TILLING中的CEL 1核酸酶。6
大DNA的单向缺失(与核酸外切酶III结合使用)以产生有序的缺失以进行测序。7
绿豆核酸酶是从绿豆Vigna radiata的芽中纯化的单链特异性核酸酶。由于绿豆核酸酶对SsDNA和RNA的特异性高于S1核酸酶,因此它是大多数需要单链特异性核酸酶的应用的首选酶。与S1核酸酶不同,绿豆核酸酶不会切割带切口的双链DNA的完整链。
单位定义:一个单位的绿豆核酸酶在37°C的标准分析条件下,在1分钟内将1微克热变性的小牛胸腺DNA转化为酸溶形式。
储存缓冲液:含有10 mM Tris-HCl(pH 7.5),50 mM NaCl和0.01%Triton®X-100的50%甘油。
绿豆核酸酶10X反应缓冲液: 300 mM乙酸钠(pH 4.6),500 mM NaCl,10 mM乙酸锌和0.1%X-100。
质量控制:绿豆核酸酶已在多种功能检测中进行了测试,包括从裂解的限制位点精确缺失ssDNA以及部分变性的双链DNA的非随机裂解。还测试了该酶,以确保双链核酸酶活性的水平低于单链核酸酶活性的0.05%,并且没有磷酸酶活性。
参考文献
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参见Henikoff,S。(1984)基因 28,351。