西宝生物代理WAKO Phos-tag系列产品,包括Phos-tag™ Acrylamide Phos-tag聚丙烯酰胺 , SuperSepTM Phos-tag™ 磷酸化蛋白电泳预制胶, Phos-tag™ Biotin 生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测, Phos-tag™ Agarose 柱层析分离磷酸化蛋白。
磷酸化蛋白电泳试剂——Phos-tagTM
蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价翻译后修饰,可调控目标蛋白的功能,定位,特异性结合。
蛋白质的磷酸化状态(也称磷酸蛋白组学)对于评估不同的生物和病理过程非常重要。2002年,广岛大学的小池教授及其团队发表了一个双环金属络合物(1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl)amino]propan-2-olato dizinc(II) complex) 在中性条件下作可选择性结合磷酸化标签分子,即Phos-tagTM 。此后,各种磷酸蛋白质组学研究方法,在使用Phos-tagTM的衍生物后得到了发展。
Phos-tagTM 系列S是特异性结合磷酸化离子的一种功能性分子,具有以下特点:
1.与磷酸离子(2-)的选择性结合能力强于其他阴离子
2.在生理条件下(PH5-8)形成稳定的化合物
1. Phos-tag™ Acrylamide
Phos-tag™ Acrylamide SDS-PAGE可根据迁移率不同,区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。该方法只需在常规的SDS-PAGE胶中添加Phos-tag™ Acrylamide和MnCl2即可进行实验(制胶过程中添加,如需详细说明请联系我们)。
特点
# 非放射性元素,非荧光物质
# 磷酸化蛋白亚型可以在同一电泳道分离出多条带
# 操作简便,与常规SDS-PAGE蛋白电泳相似
# Phos-tag™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
# Phos-tag™ SDS-PAGE实验后,可进行常规的免疫组化、质谱等
# 性质稳定,溶于蒸馏水后可以稳定保存至少3个月
# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同时被分离检测
# 不同位点磷酸化修饰以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来
原理
应用
3. Phos-tag™ Biotin 生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测
用于免疫印迹检测磷酸化蛋白
特点:
1. 可用于所有的磷酸化蛋白检测
2. 与普通WB检测相似。但无需使用磷酸化抗体
4. Phos-tag™ Agarose 柱层析分离磷酸化蛋白
用于磷酸化蛋白的柱层析纯化
Phos-tag™ Agarose可用于磷酸化蛋白通过柱层析富集,分离,纯化。不使用表面活性剂或还原剂,磷酸化蛋白可以在一个类似体内环境下获得。
特点:
1. 纯化时间1小时
2. 蛋白可在生理条件(PH7.5)下捕获
3. 无需表面活性剂和还原剂